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- Drug resistance and epigenetic modulatory potential of epigallocatechin-3-gallate against Staphylococcus aureusPublication . Zeferino, Ana Sofia; Mira, Ana Rita; Delgadinho, Mariana; Brito, Miguel; Ponte, Tomás; Ribeiro, EdnaAntimicrobial resistance of human pathogens, such as methicillin-resistant Staphylococcus aureus, is described by the World Health Organization as a health global challenge and efforts must be made for the discovery of new effective and safe compounds. This work aims to evaluate epigallocatechin-3-gallate (EGCG) epigenetic and modulatory drug potential against S. aureus in vitro and in vivo. S. aureus strains were isolated from the commensal flora of healthy volunteers. Antibiotic susceptibility and synergistic assay were assessed through disk diffusion accordingly to EUCAST guidelines with and without co-exposure to EGCG at final concentrations of 250 µg/ml, 100 µg/ml, 50 µg/ml, and 25 µg/ml. Transcriptional expression of orfx, spdC, and WalKR was performed through qRT-PCR. A 90-day interventional study was performed with daily consumption of 225 mg of EGCG. Obtained data revealed a high prevalence of S. aureus colonization in healthcare workers and clearly demonstrated the antimicrobial and synergistic potential of EGCG as well as divergent resistant phenotypes associated with altered transcriptional expression of epigenetic and drug response modulators genes. Here, we demonstrate the potential of EGCG for antimicrobial treatment and/or therapeutic adjuvant against antibiotic-resistant microorganisms and report divergent patterns of epigenetic modulators expression associated with phenotypic resistance profiles.
- Análise à qualidade de energia nas instalações elétricas do Instituto Superior de Engenharia de LisboaPublication . Ferrolho, César Augusto da Silva; Barata, Filipe André de Sousa Figueira; Gamboa, Paulo José Duarte LandeiroA qualidade de energia elétrica tem sido alvo de interesse e discussão nos últimos anos, muito devido a questões relacionadas com custos, continuidade de serviço e eficiência energética das instalações. A fraca qualidade de energia elétrica pode-se revelar de diferentes formas, na faturação da energia reativa, nos disparos sucessivos de proteções, no sobreaquecimento ou sobrecarga dos equipamentos e condutores, na redução significativa da vida útil dos condensadores e nos fenómenos de ressonância com a rede. Esta dissertação apresenta como principal objetivo a análise da qualidade de energia nas instalações do campus escolar ISEL, em concreto o trabalho incidiu na monitorização dos dois Postos de Transformação e nos quadros elétricos dos diferentes edifícios que constituem o campus. A recolha de dados de foi efetuada através de um analisador de rede LEM Topas 1000. A informação recolhida possibilitou o tratamento gráfico de diferentes grandezas e a sua subsequente análise quantitativa e qualitativa, sustentadas nas normas e legislação existente, nomeadamente NP EN 50160; IEC 61000-2-3 e IEEE Std 1159-2019. Foi também desenvolvido neste trabalho o modelo em Matlab/Simulink da rede do ISEL, para que quando identificadas as anomalias seja possível simular e verificar o efeito de diferentes soluções na mitigação das mesmas.
- Desenvolvimento de uma rede neuronal de convolução para reconhecimento de hérnias discais em imagens de ressonância magnéticaPublication . Soares, Sibel Carolina Câmara; Freire, LuísIntrodução: A hérnia discal lombar (HDL) é, atualmente, a causa mais frequente da radiculopatia lombar nos adultos jovens. A IA é considerada “a tecnologia que define o futuro”, pelo que é extremamente pertinente demonstrar a fiabilidade do uso desta tecnologia de elevado potencial no diagnóstico de HDL, fazendo uso da técnica imagiológica de maior sensibilidade e acurácia diagnóstica, a ressonância magnética. Objetivos: O objetivo principal deste trabalho é desenvolver e treinar uma rede neuronal de convolução (CNN) destinada a auxiliar o diagnóstico de HDL, tendo por base imagens de ressonância magnética da coluna lombar no plano axial. Métodos: O desenho de estudo é de carácter descritivo e estatístico, secundário, de recuperação e análise crítica da literatura. No total, foram recolhidas e analisadas 48 345 imagens totais de ressonância magnética da coluna lombar, referentes a 515 utentes, as quais se encontram disponíveis numa base de dados pública. Destas imagens, escolheram-se 3 172 ponderadas em T2 e referentes aos planos axial e sagital. Posteriormente, recorrendo a um algoritmo de data augmentation, foram geradas 35 600 imagens desenvolver destinadas a treinar e validar duas CNN (VGG16 e VGG19). Resultados: Foram alcançados excelentes valores de accuracy durante a validação das redes, com os melhores resultados a chegarem a cerca de 0,9; estes resultados foram acompanhados de funções de loss decrescentes no processo de validação que atingiram valores de 0,5. Conclusões: O contributo deste trabalho pode ser importante para o desenvolvimento de um algoritmo capaz de detetar HDL em imagens de ressonância magnética com uma precisão muito próxima da executada pelos profissionais de saúde mais experientes.
- Off-label use of bevacizumab in age-related macular degeneration: protocol for a systematic review and meta-analysisPublication . Estarreja, João; Valente, Carina; Silva, Carina; Camacho, Pedro; Mateus, VanessaBackground: Age-related macular degeneration (AMD) is recognized as the leading cause of vision loss in elderly people. Taking into account the phenomenon of aging worldwide, the prevalence of AMD is expected to increase gradually in the future. AMD can be divided into early, intermediate and late stages, where early and intermediate are mainly asymptomatic, late-stage can be classified as non-vascular AMD and vascular AMD. Current pharmacological treatment in vascular AMD includes the administration of anti-VEGF agents, such as ranibizumab, pegaptanib, and aflibercept. Additionally, it has been reported that the off-label use of bevacizumab, through intravitreal administrations, demonstrates to be effective along with a lower cost in comparison to other agents used, which makes it a new possible pharmacological approach. Objective: This review aims to evaluate the efficacy, safety, and efficiency of the use of bevacizumab in the treatment of neovascular AMD. Methods: To identify and select relevant articles present in current literature, it will be developed a highly sensitive search strategy. To develop this search, it will be used MEDLINE via the Pubmed platform. It will be only considered randomized controlled clinical trials, where it is compared the use of bevacizumab with another pharmacological agent, such as ranibizumab, or even a placebo, in patients aged 50 years and older, diagnosed with vascular AMD. Results: This project has no funding and it has been done by a multidisciplinary research team of pharmacologists and orthoptists. The study was initiated in May 2021 with the lineation of the protocol, now the data are been extracted and analyzed, and it is expected to be released by the end of 2022. Conclusions: This review will provide a synthesis of the current information and underlying evidence, about the influence of the off-label use of bevacizumab in this disease. Altogether, it will allow having a clearer vision of a new possible accepted pharmacological approach for the treatment of vascular AMD. Clinical Trial: The protocol for this review was registered in the International Prospective Register of Systematic Reviews (PROSPERO) with the code CRD42021244931.
- A key role for microRNAs in the development and functional differentiation of γδ T cell subsetsPublication . Inácio, Daniel; Amado, Tiago; Sobral, Daniel; Cunha, Carolina; Silva, Marta; Pamplona, Ana; Enguita, Francisco; Gomes, Anita Q.; Silva-Santos, BrunoThe ability of murine γδ T cells to rapidly produce the pro-inflammatory cytokines interleukin-17 (IL-17) or interferon-γ (IFN-γ) underlies their crucial roles in several (patho)physiological contexts. This capacity stems from a complex thymic process of ‘developmental pre-programming’, after which a large fraction of γδ T cells migrates to peripheral sites already committed to producing IL-17 or IFN-γ. We have previously found that miR-146a maintains the cell identity of peripheral IL-17-committed gδ T cells by inhibiting IFN-g production. To further address the role of microRNAs in γδ T cell differentiation, we isolated pure IL-17+ and IFN-γ+ γδ T cell populations from the peripheral lymphoid organs of a double reporter IL-17-GFP: IFN-γ-YFP mouse strain to perform small RNA-sequencing. This allowed us to identify distinct microRNA signatures associated with cytokine expression in γδ T cells, from which we selected ten microRNAs differentially expressed between IL-17+ and IFN-γ+ subsets to further characterize. We first analyzed the expression pattern of each candidate microRNA in γδ T cell subsets throughout mouse ontogeny and upon gain-of-function studies in in vitro γδ T cell cultures. Our results indicate that while some microRNAs regulate γδ T cell development in the thymus, other candidates modulate their peripheral effector functions. More specifically, using a miR-181a deficient mouse model, we have found that miR-181a, highly expressed in immature γδ T cell subsets in the thymus, shifts the IL-17/IFN-γ balance towards the IL-17-pathway in neonatal life, which is further maintained in the periphery during adult life. On the other hand, miR-7a-5p and miR-139-5p, overexpressed in peripheral IFN-g+ γδ T cells, regulate peripheral γδ T cell effector functions, either promoting functional plasticity or acting as an IFN-γ auto-repressor, respectively. Finally, miR-322-5p and miR-450b-3p, overexpressed in IL-17+ γδ T cells, may have therapeutic potential by modulating IFN-γ levels, which are critical in anti-tumoral and antiviral responses.
- Auto-sintonização de controladores PID através de métodos de otimização SimplexPublication . Calçada, André Gonçalo da Silva; Igreja, José Manuel Prista do Valle Cardoso; Domingues, Nuno Alexandre SoaresNo contexto atual, a procura por a melhoria contínua nas diversas áreas da ciência e do meio industrial é uma necessidade absoluta. Nesse sentido, e de forma particular na área do controlo de sistemas essa necessidade é também verificada. Mais concretamente na área do controlo de sistemas com os órgãos PID essa situação é possível verificar devido ao número de estudos publicados com o objetivo de criar regras de sintonização para os órgãos PID, em que, se verifica que existem atualmente mais estudos publicados para a sintonização PID do que sobre o próprio algoritmo PID, justificada pela correlação da sintonização PID e desempenho ótimo do controlador. Ao se abordar a questão da procura por os melhores parâmetros para o controlador, surgem as técnicas da otimização, em que, por sua vez ao se abordar a disciplina da otimização é inevitável não pensar em como abordar um dos métodos de otimização mais conhecidos, sendo este o método simplex. Têm surgido estudos recentes neste sentido de como utilizar o método simplex para a sintonização de controladores PID, no entanto, estes mesmos estudos limitam-se a apresentar os resultados (que são positivos) mas todo o método e o procedimento em si de como efetivamente ser executado é grandemente ocultado. Neste trabalho executa-se o método, a fim de testar a metodologia proposta, para dinâmicas de segunda, terceira e quarta ordens, bem como, explica-se e ilustra-se todo o processo em si, cuja chave principal passa pela construção de um sistema recursivo dado pela resposta do controlador discreto em consonância com o modelo de estado discreto do processo. Como resultados obteve-se a sintonização do controlador PID para as dinâmicas de segunda, terceira e quarta ordens, com os valores das variáveis respetivamente de (𝑘𝑝, 𝜏𝑖, 𝜏𝑑 = 0,11055, 0,362872, 1,61E-17), (𝑘𝑝, 𝜏𝑖, 𝜏𝑑 = 0,118107, 0,075027, 9,654E-17) e (𝑘𝑝, 𝜏𝑖, 𝜏𝑑 = 0,6161747, 0,212889, 0) e como conclusões verificou-se a eficácia do método aplicado, pela utilização do mesmo na minimização do índice ITAE com o método simplex, para todas as dinâmicas.
- Citologia de impressão da superfície ocular: uma revisão sistemáticaPublication . Rosa, Gonçalo André Custódio; Mendonça, PaulaIntrodução: A superfície ocular demonstra várias lesões do organismo, de diferentes etiologias. Para o diagnóstico citológico e caracterização de patologias que afetam a superfície ocular, a citologia de impressão da superfície ocular surge como uma alternativa às metodologias habituais. Contudo, pelo facto da citologia de impressão da superfície ocular ser pouco estudada, faz com que exista uma falta de padronização relativamente à mesma. Objetivo: Reunir um corpo de evidência científica sobre a aplicabilidade, eficácia e vantagens da citologia de impressão aplicada ao olho, ajudando a possibilitar a sua implementação na rotina laboratorial para patologias que afetam a superfície ocular, caso se revele adequada para tal. Metodologia: Realizou-se uma revisão sistemática. Recorreu-se à pesquisa relativa ao tema em várias bases de dados. Todos os artigos resultantes desta pesquisa, após remoção de duplicados, foram sujeitos à aplicação de critérios de elegibilidade. Como consequência deste processo obtiveram-se os artigos a sintetizar. Estes foram sistematizados por objetivo e conclusão, de modo a serem tiradas ilações. Resultados: Foram identificados pela pesquisa 58 estudos no total, obtendo-se 13 artigos a sistematizar. Análise e discussão dos resultados: A citologia de impressão permite o diagnóstico etiológico de várias doenças que afetam a superfície ocular, a documentação de mudanças sequenciais nesta ao longo do tempo, e o estadiamento da metaplasia pavimentosa da conjuntiva. Apresenta um papel preponderante em situações de olho seco. É um procedimento simples, com baixo custo, confortável, pouco invasivo, com bons resultados e rápido. Esta técnica, para além de apresentar várias aplicações clínicas, funciona ainda como uma ferramenta investigacional. Considerações finais: A citologia de impressão apresenta-se bastante útil na avaliação da superfície ocular, permitindo a deteção e monitorização terapêutica de doenças que afetam o olho. Esta técnica pode adquirir um forte componente investigacional e dá esperança a pacientes com patologias que afetam o olho, tais como a síndrome do olho seco. Por todas as vantagens deste método, seria proveitosa uma aplicação do mesmo à rotina.
- Microbial contamination in firefighter headquarters’: a neglected occupational exposure scenarioPublication . Viegas, Carla; Gomes, Bianca; Pimenta, Raquel; Dias, Marta; Cervantes, Renata; Caetano, Liliana Aranha; Carolino, Elisabete; Twarużek, Magdalena; Soszczyńska, Ewelina; Kosicki, Robert; Viegas, SusanaOne of the occupational environments that need intervention to overcome the lack of information concerning exposure to biological agents is the Firefighter Headquarters’ (FFH). This study intends to assess the microbial contamination in Portuguese FFH with a multi-approach protocol for sampling and analyses using active (air samples by impaction and impingement) and passive (surface swabs collected as swabs, settled dust, cleaning cloths and mops, electrostatic dust cloths, and identification badges) sampling methods. The fungal contamination was also characterized through molecular detection of toxigenic species, antifungal resistance, and mycotoxins profile. Cytotoxicity assessment was included in specific cells line using the MTT assay in order to recognize the possible health effects. It was raised concern regarding the following findings: a) microbial contamination didn't comply with Portuguese IAQ legal requirements in most of the FFH (bacteria load 63.63%, fungal load 45.45%); b) fungal exposure through inhalation underlining a possible risk factor for respiratory diseases; c) prevalence of Aspergillus sp. in cleaning materials that might represent a potential source of cross-contamination; d) widespread of Aspergillus section Fumigati in all the FFH analysed; e) trend of multidrug resistance found among fungi with a focus on Fumigati isolates; f) detection of several mycotoxins (fumonisin B2, nivalenol, mycophenolic acid, and sterigmatocystin) and; g) potential role of Aspergillus genus in the cytotoxicity found, particularly in lung cells. The multi-approach on sampling methods (active and passive) and laboratory assays (culture based-methods, molecular tools, mycotoxins detection, cytotoxicity evaluation) improved data findings, enabling a more detailed and accurate risk characterization.
- MRSA colonization in workers from different occupational environments: a one health approach perspectivePublication . Oliveira, Ketlyn; Viegas, Carla; Ribeiro, EdnaStaphylococcus aureus and particularly methicillin-resistant S. aureus (MRSA) infections are currently associated with extremely high morbidity and mortality rates worldwide. The global escalation in the development of antibiotic-resistant human pathogens and S. aureus's ability in developing new clones with the capacity to invade community settings leads to an urgent need to develop accurate and efficient assessments of S. aureus colonization in occupational settings, particularly those with increased risk of human and animal colonization and food contamination. Here we present cross-sectional studies with the aim to assemble crucial information regarding MRSA prevalence in workers from five different Portuguese occupational environments (bakeries, swineries (humans and animals), ambulance crews, veterinary clinics, and healthcare facilities). Our data demonstrated a high prevalence of S. aureus asymptomatic carriers among bakery workers (40%; 75% MSSA and 25% MRSA), swinery workers (54%; 8% MSSA and 46% MRSA), firefighters (48.5%; 24% MSSA and 21% MRSA) and healthcare workers (Study 1: 42.2%; 18.4% MSSA and 23.7% MRSA, Study 2: 43.3% MRSA). S. aureus prevalence in veterinary staff was 7.1% (MSSA), lower than the results obtained in control groups (33.3% S. aureus; MRSA 4% to 10%). The present study sustains the urge to develop an accurate and efficient assessment of S. aureus human and animal colonization, particularly in high-risk occupational settings, with proper guidelines and validated procedures in order to avoid potential hazardous health outcomes associated with bioaerosol exposure and associated infectious diseases.
- Prevalence of major and minor electrocardiographic abnormalities and their relationship with cardiovascular risk factors in AngolansPublication . Gonçalves, Mauer A. A.; Pedro, João Mário; Silva, Carina; Magalhães, Pedro; Brito, MiguelAims: To identify the prevalence of major and minor electrocardiographic abnormalities and their association with the main risk factors for cardiovascular disease in a population in the province of Bengo, northern Angola. Methods: A cross-sectional community-based study was conducted and a representative random sample stratified by sex and age was selected. In total, 2379 black individuals were included in the final analysis. A standard 12-lead ECG was recorded from all participants, analyzed and processed by the University of Glasgow software, and coded by the Minnesota code. Results: 22.3% of participants had minor electrocardiographic abnormalities and 4.58% major ECG abnormalities. The most common minor ECG abnormalities were abnormal T wave inversion, minor isolated ST abnormalities, and premature beats. The most common major ECG abnormalities were Left ventricular hypertrophy with major ST-T abnormalities, Ventricular conduction defects, and major Q-wave abnormalities. Hypertension, diabetes mellitus, hypercholesterolemia, alcohol consumption, and smoking, were significantly associated with major and minor electrocardiographic abnormalities. Conclusions: In this study, several participants had minor and major electrocardiographic abnormalities. Minor electrocardiographic abnormalities were more prevalent in men and major abnormalities in women. The electrocardiographic abnormalities had significant associations with the main cardiovascular risk factors.