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- A Flow Injection Methodology for Acetamide Determination Using a Tubular Bioreactor and na Ammonium Sensor †Publication . Veríssimo, Marta I. S.; Silva, Nelson A. F.; Karmali, Amin; Gomes, Maria Teresa S. R.Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a Gram-negative bacterium quite versatile that grows in the soil, in coastal marine habitats, as well as in the tissues of plants and animals. P. aeruginosa is the source of amidase (acylamide amidohydrolase E.C. 3.5.1.4) which catalyzes the hydrolysis of a small range of short aliphatic amides into the corresponding carboxylic acids and ammonia. A low cost piezoelectric quartz crystal coated with a selective membrane for ammonium was used to detect the reaction product. Conversion of amide into the correspondent amine was achieved both with cell-free extract of P. Aeruginosa or the whole cells. This conversion was first performed in batch and later on injected into the sensor system where a buffer carrier was flowing over the coated crystal. Another approach consisted in incorporating a conversion reactor with the immobilized cell-free extract of P. Aeruginosa in the FIA system. Amide solutions were injected and carried by the buffer stream through the reactor and then directed to the sensor. Different supports were used for immobilization, such as calcium alginate beads, glass beads and the inside walls of a hollow glass column. The best arrangement allowed acetamide determination without sensitivity lost for 1-month period.
- Heparin functionalization of fibrin hydrogels for tissue engineeringPublication . Ramalho, Jéssica Reais; Malheiro, Afonso de Botelho Ferreira Braga; Calado, Cecília Ribeiro da CruzA engenharia de tecidos constitui uma elevada promessa para a completa restauração de tecidos e de órgãos danificados, podendo assim mudar o paradigma da medicina atual. Sendo a base da medicina regenerativa, possui o intuito de revolucionar as formas de melhorar a saúde e a qualidade de vida de milhões de pessoas em todo o mundo, restaurando, mantendo ou melhorando a função dos tecidos e órgãos. Devido ao seu elevado potencial, são já numerosos os exemplos de aplicações publicados, quer em revistas científicas quer nos meios de comunicação normais. De realçar que esta é uma área multidisciplinar com vertentes sociais, económicas, ambientais e éticas, necessitando, portanto, de equipas de profissionais interdisciplinares como da medicina, biologia, química, física, ciências dos materiais, computacionais e de engenharias. Nas últimas décadas, a engenharia de tecidos tem-se debruçado sobre o desenvolvimento de substitutos capazes de simular histológica, fisiológica e morfologicamente o tecido humano. Esta necessidade surgiu devido à procura de suportes eficazes e seguros para reparação e regeneração de vários tecidos e órgãos vitais; assim como a carência de modelos adequados dos sistemas do corpo humano. Os modelos animais tradicionalmente utilizados para suprimir esta última necessidade não permitem mimetizar com precisão as principais características das patologias humanas, em grande parte devido às diferenças entre as espécies. Em adição, não é possível a aplicação deste tipo de modelos em plataformas de “high-throughput”, que permitem testar, em paralelo e com rapidez, centenas a milhares de compostos para identificação e seleção dos mais promissores, reduzindo os custos e duração dos ensaios clínicos. Desta forma, o desenvolvimento de novos modelos celulares que mimetizem o tecido humano e patologias associadas de forma mais precisa tem ganho elevado interesse. Tendo como objetivo mimetizar in vitro as características de tecidos humanos, é fundamental ter em conta a organização celular tridimensional (3D) do tecido. Esta configuração 3D deverá permitir a regulação de parâmetros como a disponibilidade de nutrientes ou fatores de crescimento, o stress mecânico induzido pelo sistema de cultura, as interações célula-célula e célula-matriz extracelular, entre outros; pois terá um impacto direto na ativação e direcionamento das vias de diferenciação e funcionalidade celular, conferindo uma maior similaridade entre o modelo e o tecido in vivo. Com este propósito, têm sido desenvolvidos sistemas com um maior nível de complexidade, em comparação com as tradicionais culturas em monocamada de células. Entre os sistemas mais utilizados encontram-se as culturas in vitro 3D, em que a estratégia passa pela encapsulação das células em matrizes. Estes modelos 3D poderão assim atingir, a longo prazo, a substituição da técnica tradicional de transplantação de órgãos e tecidos, permitir a diminuição da dependência sobre a utilização de modelos animais, e contribuir fortemente para o desenvolvimento de ensaios mais precisos para a avaliação e identificação de novos fármacos, apresentando-se, desta forma, como uma alternativa complementar tanto para a investigação como para a indústria. No entanto, um dos maiores desafios em engenharia de tecidos é a vascularização e a inervação de tecidos, que permitam o real funcionamento a médio e longo prazo dos tecidos/ órgãos. Para tal, é necessário compreender os desafios relacionados, por exemplo, com a fabricação de uma rede tridimensional funcional de tecidos que permita uma perfusão e difusão adequada para uma boa disponibilização de nutrientes e de oxigénio, para o normal crescimento, diferenciação e proliferação celular. É assim crucial o desenvolvimento de modelos/microambientes 3D envolvendo células, e/ou fatores de crescimento, e que simulem e permitam o teste de biomateriais quanto às suas características vasculares mecânicas, endoteliais e anti-trombogénicas. Para abordar este desafio, o objetivo desta tese foi melhorar as características de um material, que envolvia a conjugação de fibrina com heparina (HCF) e a inclusão de microcanais num hidrogel para aplicações neurais e vasculares. A melhoria de hidrogéis pré-existentes e a adição de microcanais podem promover suportes adequados para engenharias de tecido neural e vascular. Os hidrogéis são polímeros que através de ligações cruzadas formam uma rede tridimensional hidrofílica de cadeias poliméricas e que absorvem uma quantidade considerável de solvente, devido à sua forte afinidade com a água e com a maioria das soluções aquosas. São considerados materiais fortemente hidratados e são aplicados na regeneração de tecidos como substitutos da matriz extracelular. A sua importância deve-se à semelhança das suas propriedades físicas com as dos tecidos in vivo, tais como o elevado conteúdo em água, consistência macia e elástica, e baixa tensão superficial. A fibrina foi o material selecionado de forma a constituir a estrutura suporte do modelo 3D devido à possibilidade de se ajustar a morfologia, propriedades mecânicas e estabilidade do hidrogel controlando a sua concentração. Para além disso, a fibrina é biocompatível, a sua taxa de degradação é controlável e os produtos de degradação não são tóxicos. Quanto à escolha da funcionalização do hidrogel com heparina (HCF, Heparin-conjugated fibrinogen), esta foi devido à elevada afinidade da heparina por fatores de crescimento como o fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) e o fator de crescimento neural (NGF). A retenção destes fatores pode promover um ambiente ideal para a adesão, migração, orientação e proliferação de células. Para efetuar o estudo do comportamento de células no hidrogel, foram incorporados tenócitos, fibroblastos alongados e especializados do tendão. A sua importância deve-se aos fibroblastos serem células que residem dentro da matriz extracelular de vários tecidos conjuntivos, e que são críticos para a síntese e reparação da matriz. Em resposta a lesões e durante o crescimento tumoral, os fibroblastos são ativados e reconhecidos como miofibroblastos, células de cicatrização de feridas que reparam o tecido danificado através da secreção de colagénio, fibronectina, proteoglicanos, fatores de crescimento do tecido conjuntivo, entre outras proteínas e enzimas. Como sintetizadores e modificadores da matriz extracelular, os fibroblastos também desempenham um papel fundamental no crescimento nervoso e na angiogénese. A angiogénese é a formação de novos vasos sanguíneos a partir de vasculatura existente. O processo ocorre em condições fisiológicas, como por exemplo, durante o desenvolvimento embrionário e cicatrização de feridas; e em condições patológicas, como por exemplo, durante o crescimento tumoral. O processo envolve a ligação de fatores de crescimento como o VEGF, importantes para a proliferação, migração e diferenciação de células, promovendo a formação de novos vasos sanguíneos. O electrospinning foi o método escolhido para a fabricação das microfibras, uma vez que este processo permite obter razões elevadas de área superficial por volume, dimensão de poros adequados às dimensões das células, funcionalização de superfícies e múltiplos locais para interação e conexão celular, e reduzida limitação de fenómenos de transferência de massa. As microfibras foram baseadas em poly(N-isopropylacrylamide) (pNIPAM), um polímero termorresistente, mas que apresenta uma temperatura de solução crítica (LCST) de 32°C. Esta característica permite a incorporação das microfibras no HCF e a sua subsequente remoção, originando micro-canalizações. Neste âmbito, é fabricado um hidrogel otimizado com microcanais, o qual pode constituir um modelo biomimético funcional e viável para a promoção de vascularização e de inervação de tecidos. Para alcançar este objetivo, o presente trabalho englobou: (1) o processo de design, fabricação e caracterização do hidrogel, (2) seeding do hidrogel com tenócitos para testar comportamentos celulares e (3) fabricação de microfibras pNIPAM para criação dos microcanais no hidrogel. Das experiências realizadas observou-se que foi possível ativar e ligar a heparina ao fibrinogénio. Também foi observado que o tempo de gelificação dos hidrogéis aumenta com o aumento da concentração de fibrina conjugada com heparina. Observaram-se dificuldades de polimerização aquando da utilização de 40%, 50%, 75% e 100% de concentração de HCF. Através de análises com o corante azul de dimetilmetileno e de ensaios de imunoabsorção enzimática (ELISA), quantificou-se a heparina e o fator de crescimento VEGF-A dentro do gel e da sua libertação entre 5 e 7 dias, respetivamente. Observou-se que os hidrogéis conseguem reter quer heparina quer VEGF-A. Nos estudos 2D e 3D de incorporação de tenócitos nos hidrogéis de HCF, observou-se a adesão das células em hidrogéis com concentrações de 10%, 35% e 50% de HCF. As melhores configurações de diâmetro e de alinhamento de fibras foram obtidas por electrospinning com fibras de 50% pNIPAM em clorofórmio/DMF numa razão de 7:3, bem como de 40% pNIPAM em clorofórmio/DMF numa razão de 3:1. Em termos de perspetivas futuras, sugere-se a continuação da otimização do processo de formação dos hidrogéis de HCF de forma a minimizar as dificuldades de polimerização observadas. Também se sugere uma melhor caracterização dos hidrogéis, especialmente em situações de incorporação de células. Em suma, espera-se que os resultados obtidos no presente trabalho contribuam para o desenvolvimento de modelos biomiméticos neuronais e vasculares, singulares ou combinados, para estudos in vitro e aplicações regenerativas.
- Economia e finanças no debate desportivo em televisão: o caso do programa 'O dia seguinte' da SIC NotíciasPublication . Pereira, Ricardo Rafael da Costa Prudente; Andrade, Carlos; Silvestre, João Alexandre ParreiraEste relatório de estágio descreve os meus seis meses de estágio na SIC (Sociedade Independente de Comunicação), entre 19 de dezembro de 2016 e 16 de junho de 2017, no âmbito do Mestrado em Jornalismo da Escola Superior de Comunicação de Lisboa. Apresenta também uma análise à importância dos temas de cariz económico-financeiro no programa de debate desportivo “O Dia Seguinte”, transmitido na SIC Notícias nas segundas-feiras à noite. O objetivo foi avaliar o tempo de debate dedicado a assuntos de cariz económico-financeiro relacionados com as Sociedades Anónimas Desportivas do Sport Lisboa e Benfica, do Sporting Clube de Portugal e do Futebol Clube do Porto (clubes representados de maneira não-oficial pelos três comentadores residentes do programa); as razões e escolhas subjacentes ao tempo dedicado; os temas económico-financeiros mais debatidos; e os critérios de noticiabilidade e o valor-notícia utilizados. Procurou-se também identificar quem, no programa, desempenha o papel de gatekeeper e como o faz. Verificou-se que estes temas tiveram reduzido destaque nos 24 programas “O Dia Seguinte” analisados, que coincidiram com o período de estágio, já que ocuparam apenas 321 minutos num total de 2344 minutos de tempo útil de debate, com claro domínio das transferências de jogadores (155 minutos). De acordo com o que foi possível concluir a partir das entrevistas realizadas, isso deve-se a diversos fatores: falta de formação dos jornalistas desportivos na área financeira; falta de tempo para trabalhar temas complexos; falta de cooperação com a editoria de Economia; especificidades do jornalismo televisivo; e aparente desinteresse da maioria dos espectadores em relação a estes temas.
- Estudo comparativo das representações maternas em díades com bébes de pré-termo (prematuros) e extremo pré-termo (prematuríssimosPublication . Casimiro, Rute Isabel de Carvalho Patrocínio; Fuertes, MarinaPesquisas anteriores indicaram que, comparativamente às mães de termo, as mães dos bebés prematuros apresentavam perceções mais negativas acerca da gravidez e do parto, mostravam-se mais preocupadas com a saúde e desenvolvimento do seu bebé, contudo mais confiantes quanto ao futuro e mais otimistas quanto às suas capacidades para se relacionarem positivamente com os seus filhos. Embora alguns estudos indiquem que relações entre estas representações estão associadas à qualidade subsequente da relação mãe-filho(a), pouco sabemos sobre as representações das mães dos bebés prematuríssimos (bebés muito e extremamente prematuros). Neste estudo, procurou-se investigar as representações maternas em díades com bebés prematuríssimos (IG<32 semanas), comparando-as com as díades com bebés prematuros (IG>32 e <36 semanas). Foi realizada, para o efeito, uma entrevista materna nas primeiras 72 horas após o nascimento a 20 mães de bebés prematuríssimos e 40 mães de bebés prematuros acerca das suas representações relativamente à gravidez, parto, nascimento antecipado, maternidade e expectativa sobre o futuro desenvolvimento do bebé. É no grupo dos bebés prematuríssimos que se verifica uma maior percentagem de mães que exprimem um sentimento de choque/pânico face à notícia da prematuridade. No entanto, e curiosamente, existem neste grupo mais mães otimistas quanto ao futuro dos filhos, se estes sobreviverem, do que no grupo das mães dos bebés nascidos de pré-termo. O grupo das mães dos prematuros subdivide-se entre as mães que antecipam imensas dificuldades e aquelas que não esperam dificuldades. Os dados obtidos serão discutidos à luz das práticas de intervenção precoce suportadas na evidência e na ação preventiva junto de pais de crianças nascidas de extremo pré-termo.
- Avaliação económica da bombagem hidroelétrica no quadro do mercado ibérico de eletricidadePublication . Barrento, Hugo Filipe Simão; Camus, Cristina Inês; Eusébio, Eduardo Adelino Mateus NunesEste trabalho tem como objetivo a análise económica de dois aproveitamentos hidroelétricos reversíveis instalados em Portugal, tendo como cenários um ano húmido e um ano seco. Pretende ainda analisar a sua viabilidade económica em ambos os cenários, confrontado a análise real com uma hipotética sem bombagem, por forma a validar a utilização e investimento neste tipo de equipamento. Conclui-se, assim, que quer em anos secos ou anos húmidos, e mesmo num cenário hipotético sem bombagem, a exploração de aproveitamentos hidroelétricos é mais lucrativa quando possuem equipamentos reversíveis.
- Gestão da comunicação em hotelaria e o seu impacto na reputação das organizaçõesPublication . Silva, Maria Cerqueira Cerdeira da; Jorge, Nuno da SilvaO presente trabalho procura à luz da disciplina de Relações Públicas analisar o sector hoteleiro em Portugal e a forma como este gere a sua reputação. Pretende-se enquadrar a gestão deste activo na gestão estratégica da comunicação das organizações e ainda demonstrar como é que as Relações Públicas gerindo estrategicamente as relações entre as organizações e os seus públicos podem influenciar a construção da reputação. Apresenta-se uma revisão bibliográfica que constitui a base teórica do trabalho, um enquadramento do sector do turismo e da hotelaria em Portugal e ainda um conjunto de entrevistas que têm como objectivo analisar a gestão da comunicação neste sector. As entrevistas foram interpretadas segundo um método qualitativo de análise com recurso à Qualitative Content Analysis, utilizando um programa específico para a sua codificação e posterior interpretação. Enquanto actividade económica a hotelaria tem vindo a desenvolver-se, mas ainda existe um percurso a percorrer na tentativa de enquadrar a práctica das Relações Públicas neste sector. Tendo em conta os avanços tecnológicos dos social media, hoje em dia, os indivíduos, em particular o consumidor final é empoderado e os conteúdos por si gerados nestas plataformas têm implicações na construção da reputação das organizações neste sector. Por conseguinte, a maior parte dos esforços de comunicação são direccionados a este público.