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Production of biological compounds with marine bacteria

dc.contributor.advisorCarvalho, Carla da Conceição Caramujo Rocha de
dc.contributor.advisorSerra, Maria Celeste Pereira
dc.contributor.authorPereira, Ricardo Manuel Ferreira dos Santos
dc.date.accessioned2019-07-10T18:23:07Z
dc.date.available2019-07-10T18:23:07Z
dc.date.issued2018-12-19
dc.descriptionTrabalho final de mestrado para obtenção do grau de mestre em Engenharia Química e Biológica-Bioprocesso.pt_PT
dc.description.abstractMarine biodiscovery is a promising field for novel compounds and materials. For the application of blue biotechnology, the development of new strategies is paramount to shorten the pipeline between enzyme and metabolite discovery and application, i.e. to increase of efficiency of the bioprocess to obtain industrial relevant yields. By understanding the mechanisms and stress conditions in the marine environment that favoured the production of a given compound by marine bacteria, high production levels of commercially interesting compounds should be achieved. The goal of this thesis was to develop a bioprocess, at laboratory scale, using marine bacteria for the production of prodiginine compound(s), which have applications in different fields including the pharmaceutical and food industries. The selected strain and product(s) were characterized using, respectively, i) 16S rRNA and lipid profile, and ii) UV-VIS, NMR, FTIR, and GC-MS techniques. Through an intense screening process in shaken flasks, using culturomics and lipidomics approaches, the growth conditions leading to the highest yields were assessed. Several parameters were evaluated, including e.g. nature of the carbon and nitrogen sources, presence of metals ions, light exposure, temperature, pH, agitation, and oxygen concentration. Additionally, the effect of specific stresses such as nutrient depletion and the growth of the cells in biofilms were also evaluated. Once the best medium composition and cultivation conditions were determined, the bioprocess was scaled up to 2 L bioreactors for further improvement of the bioprocess. The maintenance of the oxygen transfer coefficient (kLa) was used as scale-up criterion, and Büch’s, Doran’s, Michels and Miller’s Equations were firstly employed for the determination of kLa. The effect of stirring conditions, medium composition and kLa on biomass and prodiginine production was further assessed at this scale. It was found that supplementation of marine broth (MB) with appropriate nitrogen sources and metal ions increased to 200 mg/(L.h) both biomass and prodiginine productivities.pt_PT
dc.description.abstractA descoberta de novos compostos e materiais de origem marinha é um promissor campo de investigação. Para que possa haver a aplicação da biotecnologia azul a nível industrial torna-se fundamental o desenvolvimento de novas estratégias para diminuir o tempo entre a descoberta e a aplicação destes novos compostos, e para aumentar a eficiência do processo para rendimentos suficientemente altos para aplicação industrial. A compreensão dos mecanismos, e das condições de stress a que as bactérias marinhas estão sujeitas e que as levam a produzir um determinado composto, permite que este composto possa ser produzido em larga escala. O objectivo desta tese foi o desenvolvimento de um bioprocesso à escala laboratorial usando bactérias marinhas para a produção de prodigininas. Estes produtos têm várias aplicações em diferentes sectores industriais, tais como a indústria farmacêutica e a alimentar. A estirpe seleccionada e o produto por ela produzido foram caracterizados por i) 16S rRNA e pelo seu perfil lipídico, e por ii) UV-VIS, NMR, FTIR, e GCMS, respectivamente. Através de um intenso processo de análise em balão Erlenmeyer, e usando técnicas de culturomica e lipidomica, as condições de crescimento que levam a elevados rendimentos de biomassa e de produto foram determinados. Os parâmetros avaliados foram vários, e incluíram o tipo de fontes de carbono e azoto, a presença de iões metálicos, presença de luz, temperatura, pH, agitação e concentração de oxigénio no meio. Condições específicas de stress, como baixas concentrações de nutrientes, e o crescimento celular em biofilme foram avaliadas. Após a selecção da composição do meio e das melhores condições de crescimento, realizou-se o aumento de escala do bioprocesso para fermentadores de 2 L. O coeficiente de transferência de oxigénio (kLa) foi escolhido como critério de aumento de escala, e os modelos de Büch’s, Doran’s, Michels e Miller foram aplicados na sua determinação. O efeito da agitação, composição do meio e do kLa na concentração de biomassa e produto foi estudado a esta escala. Determinou-se que através do enriquecimento de meio marinho (MB) com fontes de azoto e de iões metálicos apropriados, a produtividade em biomassa e prodigininas aumentou para aproximadamente 200 mg/(L.h).pt_PT
dc.description.versionN/Apt_PT
dc.identifier.citationPEREIRA, Ricardo Manuel Ferreira dos Santos - Production of biological compounds with marine bacteria. Lisboa: Instituto Superior de Engenharia de Lisboa, 2018. Dissertação de mestrado.pt_PT
dc.identifier.tid202262006
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.21/10285
dc.language.isoengpt_PT
dc.peerreviewedyespt_PT
dc.publisherInstituto Superior de Engenharia de Lisboapt_PT
dc.subjectBioprocesspt_PT
dc.subjectBioprocessopt_PT
dc.subjectBioprospectingpt_PT
dc.subjectBioprospecçãopt_PT
dc.subjectFermentationpt_PT
dc.subjectFermentaçãopt_PT
dc.subjectMarine bacteriapt_PT
dc.subjectBactérias marinhaspt_PT
dc.subjectProdiginine compoundspt_PT
dc.subjectCompostos Prodigininospt_PT
dc.subjectScale-uppt_PT
dc.subjectAumento de escalapt_PT
dc.subjectScreeningpt_PT
dc.subjectSelecçãopt_PT
dc.subjectProdigininaspt_PT
dc.titleProduction of biological compounds with marine bacteriapt_PT
dc.typemaster thesis
dspace.entity.typePublication
rcaap.rightsopenAccesspt_PT
rcaap.typemasterThesispt_PT

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