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Efeitos citotóxicos genotóxicos da exposição individual e combinada de nanopartículas de poliestireno e bisfenol A, na linha celular GP 202: um estudo piloto in vitro

2023-09Master thesis Open access
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dc.contributor.advisorLadeira, Carinapt_PT
dc.contributor.advisorMendes, Luís Andrépt_PT
dc.contributor.authorBrito, Cláudia Bernardete da Silva Semedo de
dc.date.accessioned2024-02-05T13:12:48Z
dc.date.available2024-02-05T13:12:48Z
dc.date.issued2023-09
dc.descriptionEste projeto recebeu financiamento do concurso de Investigação, Desenvolvimento, Inovação e Criação Artística (IDI&CA) com a referência IPL/2021/PLASCOGEN_ESTeSL.pt_PT
dc.descriptionMestrado em Tecnologias Clínico-laboratoriaispt_PT
dc.description.abstractAtualmente, devido ao massivo uso comum de plásticos com diferentes formas e tamanhos, é inevitável a entrada no organismo de nanoplásticos (NPs) e aditivos tal como plasticizantes como Bisfenol A (BPA), de forma independente ou em misturas. Existe evidência científica da exposição via oral e de absorção em tecidos gástricos destes poluentes. Isto, em conjunção com a capacidade de NPs de atuar como vetor de outros, leva a que o potencial tóxico seja bastante elevado. Como tal, é necessário avaliar o impacto a nível celular e sub-celular, prevendo as consequências a nível de tecido, órgão e organismo a longo prazo. O objetivo desse estudo in vitro, foi investigar os efeitos citotóxicos, e genotóxicos, da exposição individual e combinada de BPA e nanopartículas de polistireno (PS-NPs), na linha celular gástrica GP202. Foram selecionadas concentrações ambientais relevantes e previamente testadas em literatura, para as PS-NPs - 20, 100 e 200 μg/mL e para o BPA - 0,04, 0,1 e 1 ng/mL, sendo que 0,04 ng/mL, é o valor de referência proposta pela EFSA. A citotoxicidade foi avaliada através do ensaio de Cell Titer- Blue® e a genotoxicidade, nomeadamente danos no DNA, foi investigada através do ensaio de micronúcleo por bloqueio de citocineses (CBMN), de acordo com a Guideline 487 da OCDE. Os resultados apontam que a citotoxicidade não é afetada pelas exposições individuais ou combinadas de PS-NPs e BPA. Relativamente a genotoxicidade, verificou-se um aumento estatisticamente significativo de todos os parâmetros investigados: micronúcleos (MN), pontes nucleoplasmáticas (NBPs) e protusões nucleares (NBUDs), nas exposições combinadas nas concentrações mais elevadas (200 μg/mL de PS-NPs + 1 ng/mL de BPA) em comparação com o controlo negativo. Os resultados desta investigação justificam a necessidade de realizar mais estudos com exposições combinadas de NPs e BPA, de forma a desenvolver, realizar e avaliar os riscos de misturas químicas.pt_PT
dc.description.abstractABSTRACT - Nowadays, due to the massive use of plastics of different shapes and sizes, it is inevitable that nano plastics (NPs) and their additives such as plasticizers as Bisphenol A (BPA), enter the body as single substances or mostly as a mixture. There is scientific evidence of oral exposure and absorption of these substances in gastric tissues. This, in conjunction with the NP's ability to act as a vector for other pollutants, results in a quite high toxic potential. As such, there is a need to assess the impact at the cellular and sub-cellular levels, predicting the consequences on tissue, organ, and organism levels in the long term. The aim of this in vitro study was to investigate the cytotoxic and genotoxic effects of the individual and combined exposure of BPA and polystyrene (PS)-NPs in the GP202 gastric cell line. Environmental relevant concentrations previously tested in literature were selected, for PS-NPs – 20, 100, and 200 μg/mL and for BPA – 0,04, 0,1 e 1 ng/mL, and 0,04 ng/mL, which is the reference value proposed by EFSA. Cytotoxicity was assessed by Cell Titer- Blue® assay and genotoxicity by cytokinesis-block micronucleus assay, following OECD Guideline 487. The results indicate that cytotoxicity is not affected by individual or combined exposures of PS-NPs and BPA. Regarding genotoxicity, it was observed that all the endpoints – micronucleus, nucleoplasmic bridges, and nuclear buds – were statistically significantly increased in the worst-case-scenario of combined exposure (200 μg/mL PS NPs + 1 ng/mL BPA) compared with the negative control. These results justify the need for further studies with combined exposures of NPs and BPA to develop, carry out, and evaluate the safety risks of chemical mixtures.pt_PT
dc.description.versionN/Apt_PT
dc.identifier.citationBrito CB. Efeitos citotóxicos genotóxicos da exposição individual e combinada de nanopartículas de poliestireno e bisfenol A, na linha celular GP 202: um estudo piloto in vitro [dissertation]. Lisboa: Escola Superior de Tecnologia da Saúde de Lisboa/Instituto Politécnico de Lisboa; 2023.pt_PT
dc.identifier.tid203431421
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.21/17056
dc.language.isoporpt_PT
dc.peerreviewedyespt_PT
dc.publisherInstituto Politécnico de Lisboa, Escola Superior de Tecnologia da Saúde de Lisboapt_PT
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/pt_PT
dc.subjectNanopartículas de poliestirenopt_PT
dc.subjectBisfenol Apt_PT
dc.subjectCélulas gástricas GP202pt_PT
dc.subjectCitotoxicidadept_PT
dc.subjectGenotoxicidadept_PT
dc.subjectIn vitropt_PT
dc.subjectExposição combinadapt_PT
dc.subjectPolystyrene nanoparticlespt_PT
dc.subjectBisphenol Apt_PT
dc.subjectGastric cell GP202pt_PT
dc.subjectCitotoxicitypt_PT
dc.subjectGenotoxicitypt_PT
dc.subjectCombined exposurespt_PT
dc.subjectIPL/2021/PLASCOGEN_ESTeSLpt_PT
dc.titleEfeitos citotóxicos genotóxicos da exposição individual e combinada de nanopartículas de poliestireno e bisfenol A, na linha celular GP 202: um estudo piloto in vitropt_PT
dc.typemaster thesis
dspace.entity.typePublication
rcaap.rightsopenAccesspt_PT
rcaap.typemasterThesispt_PT
thesis.degree.nameTecnologias Clínico-Laboratoriais

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