Co-­60 source: a study on induction of damages and repair kinetics in a PC3 cell line

Pires, Filipe Fernandes

Publication

Co-60 source: a study on induction of damages and repair kinetics in a PC3 cell line

2018Master thesis

dc.contributor.advisor	Belchior, Ana	pt_PT
dc.contributor.advisor	Eiras, Margarida	pt_PT
dc.contributor.author	Pires, Filipe Fernandes
dc.date.accessioned	2019-06-17T16:57:47Z
dc.date.available	2019-06-17T16:57:47Z
dc.date.issued	2018
dc.description	Mestrado em Radiações Aplicadas às Tecnologias da Saúde - Área de especialização: Terapia por Radiações.	pt_PT
dc.description.abstract	This dissertation was designed to address the study of induction and repair kinetics of Co-60-induced deoxyribonucleic acid (DNA) damages in human prostate tumor cells (PC3 cell line). The analysis aims to investigate the number of complex damage induced in this cell line, to test its repairability and its influence on cell survival capacity. It is intended that this study contributes to the characterization of the response to a specific radiation source by these malignant prostate tumor cells. The present work proposes to evaluate the radio-induced effects in the following 24 hours and to observe the integrity of the survival capacity. In the first part, an immunofluorescence assay is performed. Two biomarkers are used, phosphorylated H2AX (g-H2AX) and tumor suppressor p53 binding protein 1 (53BP1), in order to determine the number of double-strand breaks (DSBs) through their correspondence with the foci, identified by antibodies specific to the biomarkers, over several time-points from the first half hour after irradiation up to 24 hours. Subsequently, co-localization between g-H2AX and 53BP1 is tested using the correlation coefficient provided by CellProfiler. In the second part, a clonogenic assay is performed, observing the evolution of the survival fraction with increasing dose. The results showed that cellular repair after induction of damage allows a decrease in the number of DSBs, but up to 24 hours’ post-irradiation there is a level of residual damage present. Between g-H2AX and 53BP1 there appears to be a partial level of co-localization, with a tendency for decreasing throughout the repair process. In summary, the work described in this dissertation demonstrates the level of induced damage and repair kinetics of the PC3 cell line, suggesting a dose and time repair dependence.	pt_PT
dc.description.abstract	RESUMO - Esta dissertação foi desenhada para abordar o estudo da indução e cinética de reparação de danos na molécula do ácido desoxirribonucleico (DNA), induzidos por Co-60, em células humanas de tumor da próstata (linha celular PC3). A análise pretende investigar o número de danos complexos induzidos nesta linha celular, testar a sua capacidade de reparação e a sua influência na capacidade de sobrevivência. Pretende-se que este estudo contribua para a caracterização da resposta a uma fonte de radiação específica por estas células malignas de tumor de próstata. O presente trabalho propõe fazer uma avaliação dos efeitos radio-induzidos nas 24 horas seguintes e observar a integridade da capacidade de sobrevivência. Na primeira parte, é realizado um ensaio de imunofluorescência. Dois biomarcadores são utilizados, a H2AX fosforilada (gH2AX) e a 53BP1, com o objectivo de determinar o número de duplas quebras de cadeia (DSB) através da sua correspondência com os focos identificados por anticorpos específicos aos biomarcadores, ao longo de diversos pontos no tempo desde a primeira meia hora após irradiação até às 24 horas. Posteriormente, é avaliada a co-localização entre a g-H2AX e a 53BP1, com recurso ao coeficiente de correlação providenciado pelo CellProfiler. Numa segunda parte é realizado um ensaio clonogénico de sobrevivência, observando a evolução da fracção celular sobrevivente com o aumento da dose. Os resultados mostraram que a reparação celular após a indução de danos permite diminuir o número de DSB, mas até 24 horas pós-irradiação existe um nível de dano residual presente. Entre os anticorpos, g-H2AX e a 53BP1, parece haver um nível parcial de co-localização, com uma tendência para este diminuir ao longo do processo de reparação. Em suma, o trabalho descrito nesta dissertação demonstra o nível de danos induzido e a cinética de reparação da linha celular PC3, sugerindo uma dependência em relação à dose e tempo de reparação.	pt_PT
dc.description.version	N/A	pt_PT
dc.identifier.citation	Pires FF. Co-60 source: a study on induction of damages and repair kinetics in a PC3 cell line [dissertation]. Lisboa: Escola Superior de Tecnologia da Saúde de Lisboa; 2018.	pt_PT
dc.identifier.tid	202262634	pt_PT
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/10400.21/10161
dc.language.iso	eng	pt_PT
dc.peerreviewed	yes	pt_PT
dc.publisher	Instituto Politécnico de Lisboa, Escola Superior de Tecnologia da Saúde de Lisboa	pt_PT
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/	pt_PT
dc.subject	Radiation	pt_PT
dc.subject	Prostate cancer	pt_PT
dc.subject	PC3 cell line	pt_PT
dc.subject	Low-LET radiation	pt_PT
dc.subject	DSB	pt_PT
dc.subject	g-H2AX	pt_PT
dc.subject	Co-localization	pt_PT
dc.subject	Radiação	pt_PT
dc.subject	Cancro da próstata	pt_PT
dc.subject	Linha celular PC3	pt_PT
dc.subject	Radiação de baixo LET	pt_PT
dc.subject	Co-localização	pt_PT
dc.title	Co-60 source: a study on induction of damages and repair kinetics in a PC3 cell line	pt_PT
dc.type	master thesis
dspace.entity.type	Publication
rcaap.rights	openAccess	pt_PT
rcaap.type	masterThesis	pt_PT

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