ISEL - Eng. Quim. Biol. - Dissertações de Mestrado
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Browsing ISEL - Eng. Quim. Biol. - Dissertações de Mestrado by Subject "16S rRNA gene"
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- A influência da hidroxiureia no microbioma intestinal em doentes com anemia das células falciformesPublication . Fernandes, Maria Carolina de Olivença Dias; Brito, Rui Miguel DuqueIntrodução: A doença das células falciformes constitui uma desordem sanguínea monogénica e hereditária, caracterizada pela manifestação de hemoglobina S, a variante mutante da hemoglobina mais prevalente a nível mundial. A anemia falciforme resulta numa homozigotia de hemoglobina S, contribuindo com inúmeras complicações clínicas e podendo afetar a integridade do microbioma intestinal, que desempenha um papel fundamental na fisiopatologia da doença. A hidroxiureia tem vindo a ser apontada como um potencial modulador de características da anemia falciforme podendo induzir determinados efeitos benéficos no microbioma intestinal. Objetivos: Análise dos efeitos da hidroxiureia na composição do microbioma intestinal em doentes com anemia das células falciformes. Mais ainda, pretende-se avaliar qual a região mais informativa (V1-V2 ou V3-V4) do gene 16S para o estudo da composição do microbioma intestinal. Materiais e métodos: O procedimento baseou-se na análise de amostras de material fecal recolhidas antes e depois da administração de hidroxiureia em 16 crianças com anemia das células falciformes. Posteriormente estas amostras foram sequenciadas no equipamento Ilumina NextSeq 550 pela técnica de Next Generation Sequencing, aplicando primers para amplificação das regiões pretendidas (com o total 64 amostras, 32 para cada região). Os resultados foram analisados com recurso ao software STAMP e SPSS. Estas amostras foram também analisadas quanto à presença da bactéria Clostridium difficile, identificada no decorrer da sequenciação. Resultados: Os resultados permitiram observar um aumento de frequência de bactérias benéficas no microbioma intestinal após o tratamento, entre elas Blautia luti e Ruminococcus callidus. Verificou-se que os índices de alfa diversidade diminuíram ligeiramente após seis meses de administração de hidroxiureia e que a região V3-V4 mostrou ser a mais informativa. Conclusão: Os resultados demonstram que a terapêutica com hidroxiureia altera o microbioma intestinal, promovendo a frequência de espécies benéficas. Esta técnica revela-se importante para o estudo do microbioma uma vez que é um método mais rápido permitindo compreender com maior precisão a sua composição microbiana.