Browsing by Issue Date, starting with "2016-05-03"
Now showing 1 - 2 of 2
Results Per Page
Sort Options
- Produção enzimática de biodiesel a partir de resíduos agro-industriais usando a lipase imobilizada de origem microbianaPublication . Almeida, Marta Neves Rebelo de; Karmali, AminO presente trabalho teve como objectivo a optimização do cultivo de várias estirpes mutantes bacterianas Pseudomonas aeruginosa da estirpe AI3(P. aeruginosa AI3), estirpe Ph3B (P. aeruginosa Ph3B) e estirpe L10 (P. aeruginosa L10) e fúngicas (Phlebia rufa (PM), Ganoderma lucidum violeta(GV), Pleurotus ostreatus (PO) e Ganoderma carnosum (G)), para a produção da lipase a partir de resíduos agro-industriais com vista à produção de biodiesel. Em termos de optimização da produção da lipase de origem bacteriana, foi realizado um planeamento experimental organizado por um factorialcompleto de dois níveis em três factores, em duplicados, num total de oito experiências com o intuito de obter as melhores condições para a produção da lipase. Este planeamento foi concebido com dois níveis de temperatura (25ºC e 37ºC) e com dois níveis de meio de cultura (azeite e óleo usado) e de estirpe (AI3 e Ph3B) como variáveis categóricas. As melhores condições obtidas foram para o meio de cultura com azeite, a uma temperatura de 37ºC e utilizando a estirpe mutante Ph3B de P. aeruginosa. A actividade enzimática da lipase foi medida por espectrofotometria com base na hidrólise do p-nitrofenil palmitato (p-NPP) e o conteúdo de proteína no caldo de fermentação foi determinado pelo método de ligação do corante azul de Comassie. Posteriormente, foi realizado um estudo para a seleção das matrizes cromatográficas e das condições para optimização da purificação da lipase por cromatografia de afinidade com metal imobilizado (IMAC). Este estudo foi realizado em microplacas de 96 poços com diferentes resinas, diferentes quelatos de metal e lipases de várias estirpes microbianas. Foi verificado que os quelatos de cobre possuem uma maior afinidade pelas lipases, promovendo a sua retenção na matriz cromatográfica. De seguida, a lipase foi purificada por IMAC com diferentes resinascromatográficas. A lipase da estirpe mutante AI3 de P. aeruginosa foi purificada usando Sepharose 6B epoxi-activada com butanodiol-diglicidil éter- IDA-Cu (II), a pH 7 e com um gradiente de imidazole de 0 a 500 mM, obtendo-se uma actividade específica de 0.03 UI/mg, com um rendimento final de actividade de69% e um factor de purificação de 1.25. A mesma enzima foi purificada nas mesmas condições a pH 8, obtendose uma actividade específica de 0.0165 UI/mg, com um rendimento final de actividade de 265% e um factor de purificação de 2.66. Procedeu-se a uma electroferese em gel de poliacrilamida em condições desnaturantes com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) e a uma electroferese em gel de poliacrilamida em condições nativas (PAGE Nativa) da lipasepurificada da estirpe mutante AI3 de P. aeruginosa, obtendo-se uma massa molar de 42 kDa através da SDS-PAGE. Pela PAGE Nativa não se obteve bandas no gel de poliacrilamida. A lipase foi imobilizada em microplacas de 96 e de 24 poços com alginato de cálcio e com glutaraldeído (GA) tendo-se detectado actividade enzimática após a imobilização mas a sua perda de actividade enzimática foi significativa com o número de reutilizações. A produção de biodiesel foi realizada através da reacção de transesterificação de azeite ou óleos usados utilizando metanol (MeOH) na presença de um catalisador enzimático. Realizou-se o doseamento do glicerol e do biodiesel obtendo-se valores muito reduzidos de ambos. Para o doseamento do biodiesel utilizaram-se placas de cromatografia em camada fina (TLC) pois os métodos de fluorescência e os métodos colorimétricos não funcionaram e a cromatografia gasosa com detecção por espectrometria de massa (GC/MS) não estava disponível. Relativamente aos resultados da TLC, verifica-se que se obtêm melhores resultados, na produção de biodiesel, utilizando a suspensão celularcomo catalisador (em vez de se utilizar lipase livre ou imobilizada) na reação de transesterificação.
- Weakly spectrally complete pair of matricesPublication . Iglésias, Laura; Silva, Fernando C.Let and be matrices over an algebraically closed field. Let be elements of such that and . We give necessary and sufficient condition for the existence of matrices and similar to and, respectively, such that has eigenvalues.