Browsing by Author "Teixeira, Helder Santos da Paz"
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- Pesquisa de biomarcadores de genotoxicidade em sangue e soro por espectroscopia de infravermelho por transformada de FourierPublication . Teixeira, Helder Santos da Paz; Calado, Cecília Ribeiro da Cruz; Ladeira, CarinaOs biomarcadores de genotoxicidade têm sido amplamente utilizados na avaliação da exposição ambiental de trabalhadores a por exemplo agentes citostáticos, sendo estes geralmente determinados por análise de micronúcleos em linfócitos após bloqueio da citocinese. Devido à laboriosidade e complexidade desta técnica, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver um método de pesquisa de biomarcadores de genotoxicidade no sangue por espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR – Fourier-Transform Infrared spectroscopy), dado esta última técnica ser muito sensível a diferenças na constituição molecular de amostras biológicas, e em simultâneo ser baseada num protocolo experimental simples de implementar, rápido, económico e aplicável em análises de elevado débito. No presente trabalho, foram consideradas amostras de sangue congelado de 92 pessoas, sendo 46 profissionais em hospitais exposto ao citostático 5-fluorouracil, identificados como Grupo Casos, e os restantes 46 participantes, profissionais que não trabalham em ambiente hospitalar e que não foram expostos ao agente citostático, identificados como Grupo Controlo. Para além destas amostras, estavam disponíveis dos mesmos participantes soro de 23 pessoas do grupo Casos e 35 do grupo Controlo. Foi avaliado o efeito da centrifugação, grau de diluição e solução de diluição do sangue após descongelação na razão sinal/ruído do espectro de FTIR. Foi também avaliado o efeito do grau de diluição de soro. Pesquisou-se biomarcadores espectrais em amostras de sangue total, soro e de extratos de metanol de sangue, através da avaliação do efeito de diversos pré-processamento de espectros (correção de linha de base, normalização, 1ª e 2ª derivada) na análise de componentes principais. Para estes 3 tipos de amostras, pesquisaram-se bandas espectrais que fossem diferentes na média da 2ª derivada dos espectros de Casos e Controlo. Com base nas diferenças observadas na 2ª derivada do espectro, e no trabalho de outros investigadores, avaliaram-se estatisticamente diversas razões de bandas espectrais. Não foi possível identificar razões de bandas dos espectros de soro estatisticamente diferentes entre as médias das populações de Casos e Controlos. Foi possível identificar nas amostras de sangue total e de extratos de metanol de sangue, diversas razões de bandas dos espectros significativamente diferentes entre as médias das populações de Casos e Controlos. Desta forma o método de espectroscopia FTIR desenvolvido neste trabalho pode constituir uma ferramenta relevante na pesquisa de biomarcadores de genotoxicidade em amostras biológicas como de sangue, e por consequência uma ferramenta no combate ao cancro.
- Pesquisa de biomarcadores de genotoxicidade em sangue e soro por espectroscopia de infravermelho por transformada de FourierPublication . Teixeira, Helder Santos da Paz; Calado, Cecília Ribeiro da Cruz; Ladeira, CarinaOs biomarcadores de genotoxicidade têm sido amplamente utilizados na avaliação da exposição ambiental de trabalhadores a por exemplo agentes citostáticos, sendo estes geralmente determinados por análise de micronúcleos em linfócitos após bloqueio da citocinese. Devido à laboriosidade e complexidade desta técnica, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver um método de pesquisa de biomarcadores de genotoxicidade no sangue por espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR – Fourier-Transform Infrared spectroscopy), dado esta última técnica ser muito sensível a diferenças na constituição molecular de amostras biológicas, e em simultâneo ser baseada num protocolo experimental simples de implementar, rápido, económico e aplicável em análises de elevado débito. No presente trabalho, foram consideradas amostras de sangue congelado de 92 pessoas, sendo 46 profissionais em hospitais exposto ao citostático 5-fluorouracil, identificados como Grupo Casos, e os restantes 46 participantes, profissionais que não trabalham em ambiente hospitalar e que não foram expostos ao agente citostático, identificados como Grupo Controlo. Para além destas amostras, estavam disponíveis dos mesmos participantes soro de 23 pessoas do grupo Casos e 35 do grupo Controlo. Foi avaliado o efeito da centrifugação, grau de diluição e solução de diluição do sangue após descongelação na razão sinal/ruído do espectro de FTIR. Foi também avaliado o efeito do grau de diluição de soro. Pesquisou-se biomarcadores espectrais em amostras de sangue total, soro e de extratos de metanol de sangue, através da avaliação do efeito de diversos pré-processamento de espectros (correção de linha de base, normalização, 1ª e 2ª derivada) na análise de componentes principais. Para estes 3 tipos de amostras, pesquisaram-se bandas espectrais que fossem diferentes na média da 2ª derivada dos espectros de Casos e Controlo. Com base nas diferenças observadas na 2ª derivada do espectro, e no trabalho de outros investigadores, avaliaram-se estatisticamente diversas razões de bandas espectrais. Não foi possível identificar razões de bandas dos espectros de soro estatisticamente diferentes entre as médias das populações de Casos e Controlos. Foi possível identificar nas amostras de sangue total e de extratos de metanol de sangue, diversas razões de bandas dos espectros significativamente diferentes entre as médias das populações de Casos e Controlos. Desta forma o método de espectroscopia FTIR desenvolvido neste trabalho pode constituir uma ferramenta relevante na pesquisa de biomarcadores de genotoxicidade em amostras biológicas como de sangue, e por consequência uma ferramenta no combate ao cancro.