Browsing by Author "Silva, Daniela Filipa Pereira"
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- Otimização do fracionamento do efluente da cortiça recorrendo a tecnologia de membranas e estudo dos seus potenciais biológicosPublication . Silva, Daniela Filipa Pereira; Pacheco, Rita; Minhalma, Luís MiguelA incidência de doenças oncológicas e degenerativas do sistema nervoso tem vindo ao aumentar com os anos, devido ao crescente contacto com produtos tóxicos, com isto em mente muitos processos têm sido desenvolvidos de forma a combatê-las. Um dos processos consiste na utilização de efluente proveniente da indústria corticeira, sendo este rico em compostos orgânicos mais propriamente compostos fenólicos, conhecidos por apresentarem elevadas capacidade antioxidantes e protetoras. De modo a melhorar os potenciais biológicos do efluente, este foi fracionado em várias frações de tamanhos moleculares diferentes: fração leve, fração pesada e fração média, constituídas por compostos com dimensões inferiores a 9,56 kDa, superiores a 65,48 kDa e dimensões entre os 9,52 kDa e os 65,48 kDa, respetivamente. Para tal, recorreu-se à tecnologia de membranas de ultrafiltração, operando em modo de diafiltração e concentração. As diferentes membranas foram preparadas recorrendo ao método de inversão de fases, usando soluções poliméricas com diferentes conteúdos de acetato de celulose (polímero), formamida (promotor de poros) e acetona (solvente). Onde foram produzidas duas membranas com limites de exclusão molecular de 65,48 kDa e 9,52 kDa. O efluente e as frações obtidas foram caracterizados utilizando o método da cromatografia líquida de elevada resolução (HPLC-DAD), o do Folin-Ciocalteu (quantificação dos fenóis), o do DPPH (atividade antioxidante), o do TBARS (inibição da peroxidação lipídica) e ainda se analisou a capacidade de inibição da acetilcolinesterase. Sendo que na sua maioria a fração pesada apresentou melhores valores, 0,176 ± 0,065 mg/mg de extrato de fenóis totais, 0,085 ± 0,009 mg/mg de extrato de taninos, um EC50 de 21,97 ± 6,38 μg/mL e um AC50 0,342 ± 3,449 mg/mL. Os compostos identificados e caracterizados através do HPLC-DAD foram o ácido quinico, gálico, carboxílico de brevifolina, protocatecuico, vanílico, siríngico e elágico. Foram realizados ensaios em linhas celulares do cancro do fígado (HEP-G2) e do Melanoma da pele (A375). Determinando a citotoxicidade dos compostos e o potencial de proteção da fração pesada contra agentes oxidantes (H2O2 e TBHP) e físicos (radiação UV) nas células A375. Por fim, as células A375 foram visualizadas através da microscopia eletrónica de varrimento (SEM) e de fluorescência, na presença e ausência da fração.